隐孢子虫和贾第鞭毛虫的纯化—磁分离技术:1999年美国在EPA1623方法中规定利用IMS{Immuo Magnetic Separation}磁分离技术Dynabeads来分选检测饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫孢囊,其原理是:利用带有特异性的磁珠与样品中的目标产物G/C特异性抗原相结合,在磁场中搞笑选择中分离。
3、IFA染色镜检
待井形载玻片的纯化液干后,用NaOH中和井形载玻片上样品,再用Dynal公司的Aqua-GloTMG/C染色试剂盒,将卵囊和孢囊在井形载玻片上用磁荧光标记的单性和DAPI溶液着色后,盖上盖玻片。然后,OLYMPUS荧光和差分干涉相衬(DIC)显微镜对着色样本进行检测。观察样本,对符合卵囊和孢囊大小、外形、荧光特性的对象进行定性、定量分析。
饮用水源水中"两虫"检测方法及其健康风险评价研究
饮用水源水中"两虫"检测方法及其健康风险评价研究
贾第鞭毛虫和隐孢子虫(简称"两虫")是两类人兽公患的肠道寄生原虫,两虫染色试剂批发,通常呈现水源性暴发,受到国际上的广泛关注.目前"两虫"检测方法常用步骤为过滤,分离纯化,染色,镜检.其中过滤存在工作量大,成本较高,回收率不稳定等缺陷.本研究在简单易行的沉淀法基础上,建立了碳酸钙沉淀—密度梯度离心纯化的"两虫"检测方法.通过对某市开放式河网自来水厂的原水"两虫"的调查及检测,研究其健康风险.主要研究成果如下: (1)碳酸钙沉淀法能够有效地浓缩富集饮用水源水中"两虫".采用法分别对沉淀后的上清液和沉淀中的"两虫"数量进行了检测分析.在pH=10,投加碳酸氢钠,氯化钙反应1h并静置12h的条件下,上清液中贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊的平均检出率分别为1.2%,1.1%,"两虫"富集效率可达到98%以上. (2)在碳酸钙沉淀法基础上,对比研究了Percoll-蔗糖密度梯度离心及磁珠法的分离纯化效率,贵州两虫染色试剂,两者对于贾第鞭毛虫孢囊的平均回收率分别为72.3%和59.1%,而对于隐孢子虫卵囊的平均回收率分别为39.5%和52.2%,均满足美国环保局EPA的规定范围;Percoll-蔗糖密度梯度离心法对于贾第鞭毛虫孢囊具有更好的分离效率,而且其分析成本更低. (3)针对某市开放式河网的原水采样调查,采用碳酸钙沉淀/Percoll-蔗糖密度梯度离心的分析方法检测,发现10L水源水中有0-4个贾第鞭毛虫孢囊和0-13个隐孢子虫卵囊.通过剂量-效应指数模型对隐孢子虫潜在风险进行评价可知,常规处理和深度处理后出厂水中隐孢子虫的风险值分别为3.71×10-6和3.71×10-8,远低于美国所接收的高风险限值10-4,这表明在现有饮用水源水水质和处理工艺条件下,出水安全可以得到保障.
“两虫”检测技术成果获得饮用水重点实验室评估的好评。
贾第鞭毛虫和隐孢子虫,两虫染色试剂销售,简称“两虫”,是广泛存在水介传播、人畜共患的致病微生物,两虫染色试剂厂家,且具有耐氯的特点,普通消毒剂无法杀灭“两虫”,其对低下人群致死率很高。
2006年,我国将“两虫”指标纳入国家饮用水强制检测指标。但是,“两虫”检测方法源自美国EPA 1623方法,主要仪器和耗材均被美国企业垄断。而样品检测成本高等缺点,也导致“两虫”检测难以在行业内大范围普及。
“两虫”检测和计算机自动识别系统,有望扭转这一局面。该成果在检测方法、仪器研制、自动识别等方面均取得了重要突破。
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